薬学および薬学研究ジャーナル オープンアクセス

抽象的な

応答曲面法を用いた Aspergillus welwitschiae による治療用タンパク質薬剤ウリカーゼの細胞外生産のための発酵条件の最適化

ヌーラ・エル・アハマディ・エル・ナガー、SA・ハルーン、エマン・M・エル・ウェシー、AA・シェリーフ

はじめに ウリカーゼは、血液やその他の体液中の尿​​酸を測定するための臨床分析で一般的に使用されています。タンパク質医薬品としての微生物ウリカーゼは、高尿酸血症や痛風の治療、腫瘍溶解性高尿酸血症の予防と治療に効果があることがわかっています。

目的: 培養候補である Aspergillus sp. 株 1-4 は、高い細胞外ウリカーゼ活性を示しました。この尿酸分解菌分離株は、表現型特性と ITS 領域配列解析に基づいて Aspergillus welwitschiae 株 1-4 と特定されました。配列決定産物は、GenBank データベースに登録番号 MG323529 で登録されました。20 回実行の Plackett-Burman 実験設計を適用して、Aspergillus welwitschiae によるウリカーゼ生成に対する 15 の変数の重要性をスクリーニングしました。

結果: 培養時間はウリカーゼ生産に影響を及ぼす最も重要な変数であり、次いで酵母エキスと接種量であり、それぞれ有意な P 値は 0.0002、0.0083、0.0118 でした。これらの変数は、中心複合設計を使用した最適化研究のために選択されました。

結論Aspergillus welwitschiae による最大のウリカーゼ生産 (59.01 U/mL) は、次の発酵条件で達成されることがわかりました。g/L: ショ糖 30、尿酸 3、ペプトン 2、酵母エキス 2、NaNO3 2、K2HPO4 1、MgSO4.7H2O 0.2、NaCl 0.2、FeSO4.7H2O 0.03???、インキュベーション時間 7 日間、温度 35、pH 6、接種量 4 mL/50 mL 培地、接種後経過時間 72 時間、培地容量 50 mL/250 mL 三角フラスコ。統計的最適化後の培地では、プラケット・バーマン法を適用する前の最適化されていない基本培地 (23.58 U/mL) と比較して、Aspergillus welwitschiae によるウリカーゼ産生が全体で 2.5 倍増加しました。ALL治療の結果。